MLST Evidence of Two Different Sequence Types of Listeria Monocytogenes Strains Used for Commercial Veterinary Listeriosis Vaccines

俄罗斯兽用李斯特菌疫苗AUF的遗传特征解析 —— 基于多位点序列分型的疫苗菌株特征研究

作者：Natalya Kichemazova , Sergey Zaytsev , Yury Saltykov , Olga Larionova , Alexey Zaberezhny , Valentina Feodorova

俄罗斯萨拉托夫国立遗传生物技术工程大学Valentina Feodorova教授团队在Zoonoses杂志发表最新研究，该研究通过多位点序列分型（MLST）技术揭示了商业化李斯特菌疫苗AUF的菌株遗传进化特征，为优化兽用疫苗提供了关键分子依据。

单核增生李斯特菌减毒活疫苗AUF在俄罗斯联邦牧区已使用近70年，AUF包含两株单核增生李斯特菌菌株。研究显示，在长达50年的兽医临床应用监测中，两菌株在动物传代过程中未出现毒力回复现象。小鼠脑内连续传代20次、豚鼠传代5次后，其半数致死量（LD50）维持稳定。流行病学监测证实，疫苗接种使俄罗斯疫区农场李斯特菌病例死亡率从2.1%降至0.2%，免疫保护期可达12个月。

研究团队对减毒活疫苗AUF所含的两株单核增生李斯特菌菌株（AUF-1和AUF-2）进行多位点序列遗传解析，发现二者虽同属李斯特菌II谱系，但分属不同遗传型别：AUF-1为ST1538/CC7型，AUF-2为ST124/CC124型。两菌株分别源自1965年西伯利亚绵羊神经型病例分离株（A-1）和1963年阿塞拜疆牧场蜱虫分离株（A-2），系统发育分析显示，AUF-1和AUF-2均与其亲代菌株具有相同的ST型，其共同祖先可追溯至ST155型高致病株系。

MLST遗传特征差异分析揭示，与ST155型菌株相比，ST1538型菌株AUF-1在7个管家基因（abcZ、bglA等）中累计有13个单核苷酸多态性（SNP），导致ldh基因第2717位点产生组氨酸→精氨酸变异；ST124型菌株AUF-2则携带21个SNP，引发bglA和dapE两个管家基因发生K507E、V554A氨基酸替换。值得注意的是，ST124型菌株在欧洲、亚洲和美洲多个国家的饲料、动物及食品等样本中均有检出，而ST1538型迄今仅见于俄罗斯境内动物源分离株。

培养基生长实验显示，两菌株存在重要表型差异。AUF-1和A-1在选择性培养基上呈现典型单核增生李斯特菌形态，形成小而圆、半透明、低凸的菌落；而经紫外线诱变获得的AUF-2则表现为显著多形性，主要呈丝状形态。这种形态差异可能与紫外线诱导的细胞分裂相关基因突变有关，但未影响管家基因的MLST分型结果。

该项研究通过整合分子流行病学与疫苗应用大数据，揭示了李斯特菌减毒活疫苗菌株的长期遗传稳定性机制。该研究表明，商用多价疫苗可整合不同遗传背景菌株。研究团队同时建议，疫苗菌株的系统发育关系应作为质量评价核心指标，建议建立涵盖ST型别、毒力基因谱系和表型特征的三维评估体系。AUF疫苗的成功提示我们：疫苗候选菌株应选择进化距离适中的菌株组合，这样既能拓宽免疫覆盖范围，又可避免单一谱系抗原变异导致的免疫保护失效。该发现为新一代兽用李斯特菌疫苗设计提供了重要思路——通过系统发育分析筛选具有代表性和稳定性的疫苗候选株。该成果对畜牧业发达地区的疫苗选择具有直接指导意义，同时也为全球防控李斯特菌病提供了重要技术参照。

感谢Zoonoses杂志青委、青岛农业大学刘宝涛教授校对中文述评。

Citation:

Kichemazova N, Zaytsev S, Saltykov Y, Larionova O, Zaberezhny A, Feodorova V. MLST evidence of two different sequence types of Listeria monocytogenes strains used for commercial veterinary listeriosis vaccines. Zoonoses. 2025, 5(1): 8. DOI: 10.15212/ZOONOSES-2024-0050